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生物大分子三维结构解析新方法
2020-12-06
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要点


1.    常规的单颗粒分析技术是将目标分子从生物膜内取出来进行分析,而膜内真实环境下很难对大分子的结构做解析。


2.     IBSA (Image Based Structure Analysis)方法实现了在真实生存环境下膜内大分子的结构解析。


3.     此方法的开发,期待冷冻电镜在生物功能分析和制药研究方面做出大的贡献。


IBSA(Image Based Structure Analysis)方法:在冷冻状态下,通过拍摄样品台上固定的样品的倾斜像和非倾斜像,发挥单粒子分析法的优势,提高三维重构的可靠性,从而分析生物膜内蛋白质的真实结构。


此成果由东京医科齿科大学的藤吉 好則教授(开发当时任名古屋大学特聘教授)与日本电子株式会社的电子光学事业部共同开发,开发课题为【真实环境下高分辨三维生物结构解析系统】。


使用设备:JEOL冷冻电子显微镜(图1)


样品:β-galactosidase (β-半乳糖苷酶)


使用IBSA方法,成功地解析出真实生存环境下膜内大分子的结构。


通过傅里叶壳层关联函数FSC (Fourier Shell Correlation)曲线法,FSC=0.143阈值得到0.27nm分辨率(图2)。


详细信息请登录:https://www.jst.go.jp/jitsuyoka/


参考图:


图1  冷冻电子显微镜  图2  β-galactosidase的三维重构示意图


(A) FSC曲线。 红色虚线显示FSC=0.143、与红色实线最初交叉的地方定义分辨率为0.27nm


(B) 三维重构图和原子模型


(C) 酶活性部位的Mg2+离子

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